质粒是一种小型环状DNA分子，具有自我复制功能，可以携带外源目的基因进入宿主细胞进行表达。质粒既可以作为基因递送载体用于构建病毒载体，又可以作为终产品，用作预防或治疗性药物。随着DNA疫苗和基因治疗技术的快速发展，对质粒DNA规模化生产的需求不断增加。
丽山生物质粒生产平台采用QbD理念设计，整体洁净标准达C+A，为适应细胞基因治疗快速发展的需求，配备了国际一流的生产线和可放大的GMP生产工艺，可为客户提供从药物发现到IIT、从IND到NDA再到商业化生产的一站式GMP质粒CDMO服务。
| 服务类别 | 服务内容 |
|---|---|
| 质粒构建 | 客户提供质粒或序列,挑选优势菌株构建原始库 |
| 菌种库构建 | GMP条件下，进行MCB和WCB的构建和检定菌种库稳定性考察 |
| 发酵工艺开发优化 | 培养基选择，无动物源性，无抗生素高密度发酵，工艺参数优化确定关键工艺参数 |
| 纯化工艺开发优化 | 裂解工艺参数的研究和优化、超滤工艺参数的研究和优化、层析工艺参数的研究和优化 |
| 方法学开发验证 | 方法学验证：专属性、准确度、精密度、检测限等建立质量标准 |
| 稳定性研究 | 影响因素试验、加速稳定性、使用稳定性和长期稳定性 |
| 分类检测项 | 检测项 | 方法 | 检测标准 |
|---|---|---|---|
| 理化性质 | 外观 | 目测 | 无色透明液体 |
| pH | 电位法 | 7.2±0.5 | |
| 含量 | 分光光度计 | 1.0±0.2mg/ml | |
| 纯度 | UV260/280比例 | 紫外分光光度法 | 1.75-2.0 |
| 超螺旋百分比 | EtBr染色凝胶电泳 | 超螺旋比例≥80% | |
| 鉴别 | 限制性内切酶酶切 | 琼脂糖电泳 | 符合目标条带 |
| 目的基因序列检查 | Sanger测序 | 符合序列 | |
| 安全性 | 无菌 | 培养法 | 无菌生长 |
| 支原体 | QPCR | 阴性 | |
| 培养法 | 阴性 | ||
| 内毒素 | LAL检测 | ≤0.01EU/ug pDNA | |
| 残留 | 宿主RNA残留 | SYBR-Gold染色琼脂糖凝胶电泳 | Undetectable by Ethidium Bromide stain(≤0.05ug/ugDNA) |
| 宿主DNA残留 | q-PCR | ≤50ng/μg | |
| 宿主蛋白残留 | ELISA | ≤1ng/μg |
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