3分钟锁定“真MSC"! 流式细胞术让杂质细胞无所遁形
一滴血液,十万细胞,如何从中揪出真正的“修复大师”?
在再生医学的舞台上,间充质干细胞(MSC)被誉为“万能修复工”——它们能分化成骨骼、软骨、脂肪,甚至参与器官修复。然而,纯度不足的MSC产品可能导致治疗失败或严重副作用。如何确保每一份细胞制剂的安全有效?流式细胞术正是一双洞察细胞世界的“智慧之眼”。

▲示意图 | 来源网络
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为什么MSC纯度决定治疗成败?
MSC治疗的核心挑战在于:混杂的“冒牌细胞”可能引发风险。
· 安全风险:若残留造血细胞(如CD45⁺细胞),可能触发免疫排斥或炎症风暴;
· 疗效打折:非MSC杂质细胞占据空间,挤占真正修复细胞的“工作席位”;
· 法规红线:临床级MSC产品要求纯度≥95%、活率>95%,否则禁止临床应用。
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流式细胞术:
如何成为MSC的“身份鉴定仪”?
第一步:标记——给细胞贴上“荧光标签”
科学家用荧光抗体精准标记细胞表面标志物:
· “通行证”标志(阳性):CD90、CD105、CD73(MSC高表达);
· “黑名单”标志(阴性):CD45、CD34、CD11b、CD19、HLA-DR(MSC不表达)。
第二步:上机——激光下的“细胞阅兵”
细胞悬液在鞘液包裹下形成单细胞流,以每秒数千个的速度通过激光束:
· 散射光信号:侧向散射光(SSC)反映细胞颗粒度,前向散射光(FSC)提示细胞大小——MSC通常体积小、颗粒少;
· 荧光信号:激光激发抗体标记的荧光素,不同颜色对应不同标志物(如CD90-FITC发绿光,CD45-APC发红光)。
第三步:分析——数据中的“纯度密码”
软件自动计算两关键比例:
纯度(%) = CD90⁺CD105⁺CD73⁺细胞数 / 总细胞数 × 100%
污染率(%) = CD34+/CD11b+/CD19+/CD45+/HLA-DR+细胞数 / 总细胞数 × 100%

▲流式检测结果示例
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超越纯度:流式细胞术的“隐藏技能”
除纯度外,流式细胞术可同步完成多维质控:
①活率检测:台盼蓝或7-AAD染料标记死细胞,确保活率>95%;
②遗传稳定性:染色分析DNA含量,筛查非整倍体异常细胞(需<0.1%),评估细胞的遗传稳定性;
③分化潜力:可标记成骨标志物、脂肪标志物等,验证多向分化能力。
本文由山东省免疫细胞与基因治疗CDMO中试基地
质量与检测中心技术支持
山东省免疫细胞与基因治疗CDMO中试基地质量与检测中心可以为客户提供MSC细胞表型及纯度等多种检测服务。中心具备符合国家GMP要求的细胞培养室、微生物限度室、无菌室、PCR实验室等功能区。配备BD FACS Cantoll流式细胞仪、BD PHOENIX全自动微生物鉴定药敏分析系统、RocheLight Cycler480l实时定量PCR仪、Thermo超高效液相色谱等国际先进检测设备。拥有先进的免疫细胞与基因治疗检测技术,涉及细胞生物学、分子生物学、免疫学、微生物学、病毒学和物理化学等六大类学科共计19个小项,依托世界尖端检测仪器设备,有效保障及控制在开发中安全性风险。

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梁老师
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